产品FAQ
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q 【细胞培养常见问题解答】细胞死亡?(1)

a 可能原因1:细胞解冻或冻存过程中损伤大
解决方案:取用新的细胞。
可能原因2:培养基的渗透压不对
解决方案:检查完全培养基的渗透压。(大多数哺乳动物细胞可耐受的渗透压为260-350 mOsmol/kg,昆虫细胞可耐受的渗透压为340-380 mOsmol/kg)。
可能原因3:培养基中有毒代谢产物蓄积过多
解决方案:更换新鲜培养基。

q 【细胞培养常见问题解答】细胞死亡?(2)

a 可能原因4:胰酶消化过度
解决方案:缩短胰酶消化时间或降低消化用胰酶的工作浓度。
可能原因5:培养箱温度有波动
解决方案:监测培养箱内温度。
可能原因6:转染使用的转染试剂毒性过大,细胞代次过高,质粒纯度差
解决方案:使用低毒性的转染试剂或在转染后及时换液;使用低代次细胞转染;使用高品质的质粒转染。

q 【细胞培养常见问题解答】细胞死亡?(3)

a 可能原因7:细胞状态差
解决方案:取用新的细胞。
可能原因8:支原体污染
解决方案:检测培养物有无支原体污染,如果被污染,则弃之。
可能原因9:培养基中无附着因子
解决方案:如采用无血清培养方法,应确保其含有附着因子,或使用包被过的培养器皿。
可能原因10:培养箱中无二氧化碳
解决方案:定期观察二氧化碳压力表,及时更换二氧化碳钢瓶。

q 【细胞培养常见问题解答】细胞生长缓慢?(2)

a 可能原因5:细胞代次过高
解决方案:取用新的细胞。
可能原因6:轻度细菌或真菌污染
解决方案:在添加抗生素的培养基中培养细胞,如果培养物被污染,则弃之。
可能原因7:试剂储存不当
解决方案:血清应置于-5℃至-20℃下储存;培养基应置于2-8℃下避光储存;完全培养基应置于2-8℃下避光储存,并限在2周内使用。

q 【细胞培养常见问题解答】细胞生长缓慢?(1)

a 可能原因1:培养基或血清改变
解决方案:比较不同培养基中葡萄糖、氨基酸等成分有无差异;增加细胞接种密度;更换新鲜培养基。
可能原因2:必需生长促进成分(如L-谷氨酰胺或生长因子)缺乏、耗尽或降解
解决方案:使用新鲜培养基或向现有培养基中添加必需成分。
可能原因3:细胞初始接种密度过低
解决方案:增大细胞接种密度。
可能原因4:支原体污染
解决方案:检测培养物有无支原体污染,如果被污染,则弃之。