产品FAQ
首页 > 服务与支持 > 产品FAQ

q 【Trans 实验常见问题和解答】胶回收--琼脂糖凝胶块不溶?

a 1) 琼脂糖质量不好;
2) 含目的片断的凝胶在空气中放置过久,使胶块失水干燥,建议切胶后立即进行回收或将胶块保存于4 ℃或-20℃;
3) 制胶的电泳缓冲液浓度过高或陈旧。

q 【Trans 实验常见问题和解答】胶回收--加入溶胶液温浴后,液体仍很粘稠或后续步骤有堵柱子现象?

a 1)胶块溶解不充分,可再补加一些溶胶液或延长水浴时间并增加上下颠倒次数帮助溶胶;
2)胶块体积过大,应尽量切除多余部分,并将其切为小碎块,分几次回收;
3)水浴温度是否达到规定温度65℃,用温度计检测。

q 【Trans 实验常见问题和解答】胶回收--用胶回收试剂盒从凝胶中回收DNA得率低是什么原因?

a 1)胶块溶解不完全,可适当延长水浴时间和上下颠倒的次数以及增加溶胶液的比例;
2)胶块体积太大,应使用枪头捣碎,还不能充分溶解则先将其切为小块,分多次回收;
3)紫外灯下切胶时间过长,导致DNA部分降解,应尽量把切胶时间控制在30s以内;
4)洗涤液使用后未及时盖严瓶盖,乙醇挥发,影响回收效率;
5) TAE或TBE电泳缓冲液不新鲜,失去了缓冲能力,导致PH值升高,降低DNA和膜的吸附力,应及时更换电泳缓冲液,最好使用新鲜配制的电泳缓冲液,效果更好;
6) 回收前的样品量太少,加大点样量;
7)洗脱前,预先65℃预热洗脱液、延长室温静置时间、增加洗脱次数可以有效提高回收率30%以上。

q 【Trans 实验常见问题和解答】胶回收--回收率为什么与点样量和片段大小有关?

a DNA片断越大,和固相基质的结合力越强,就越难洗脱,回收率就低;DNA的量越少,相对损失越大,回收率越低。

q 【Trans 实验常见问题和解答】胶回收--切胶的时候如何能切的准呢?

a 条带的位置肉眼很难判断出来,如何判断条带的位置呢? 可以将产物与Marker一起电泳,染色后,在紫外灯下观察结果,跟Marker进行相比,就知道要的是哪条带。注意,紫外灯下切胶速度要快,否则DNA会降解,另外,紫外线对身体伤害很大,特别是眼睛,请注意采取保护措施(比如在专门的箱子里切,带眼镜等)。RNA 用具要用10%的NaOH浸泡过液,再用DEPC水冲洗干净 70%的乙醇用过国产分析乙醇有杂质,RNA酶还会有,并带入其它污染。